logo ban ban logo

Důkazem vysokého vzdělání je schopnost mluvit o největších věcech nejjednodušším způsobem.

David Hume

mendel

Výzkum

Moderní způsoby identifikace viru chřipky založené na čipové technologii s využitím nanočástic

Chřipka je akutní infekční onemocnění dýchacích cest, které způsobují RNA viry z čeledi Orthomyxoviridae. Chřipkové viry je možné rozdělit do tří rodů: chřipka typu A, B a C. Dělení chřipkových virů je založeno na odlišnostech ve struktuře chřipkového virionu, hostitelské specifitě, virulenci a klinických projevech onemocnění. Chřipka typu A může být dále členěna na jednotlivé subtypy, které se navzájem liší povrchovými antigeny: hemagglutininem (HA) a neuraminidázou (NA).

Oba antigeny mají důležité úlohy v životním cyklu viru. HA se podílí na iniciaci infekce a vstupu viru do hostitelské buňky. NA umožňuje uvolnění viru z buňky na konci replikace. Životní cyklus viru je úzce spjat s kyselinou sialovou, která tvoří receptor pro vazbu virionu (prostřednictvím HA) na povrch hostitelské buňky. Vazba HA na receptor je druhově specifická v závislosti na typu vazby kyseliny sialové – vazba ?2-3 je typická pro ptačí viry chřipky, vazba ?2-6 pro lidské typy chřipky.4 Do roku 2012 bylo popsáno 16 subtypů HA (H1-H16) u vodních ptáků, jenž jsou považování za přírodní rezervoár tohoto onemocnění, ale pouze tři z nich (H1, H2 a H3) jsou schopné vyvolat běžně onemocnění u člověka. Onemocnění vyvolaná jinými subtypy (H5 a H7) jsou mnohem méně častá a nejsou přenosná z člověka na člověka. Virus H5N1 má na svém povrchu homologní HA, který je schopen vázat se na lidské oligosacharidové receptory (kyselina N-acetylneuramininová – vazba ?2–6). Ty se však výrazně neodlišují od receptorů ptačího typu (kyselina N-acetylneuraminová vazba ?2–3). Tyto interakce zajišťují mezidruhový přenos chřipky a mohou být také použity k izolaci různých typů chřipkových virů. Od roku 2012 byly u netopýrovitých popsány další dva subtypy H17 a H18. NA se vyskytuje v 9 subtypech (všechny prokázány u ptáků, u člověka se běžně vyskytuje jen N1 a N2).

Chřipka může být specifickým onemocněním pro jeden zvířecí druh, nebo může vyvolávat onemocnění u celé řady živočichů včetně člověka.10 Chřipkové viry jsou z evolučního hlediska mimořádně úspěšné. Jejich hlavní evoluční výhodou je variabilita, která je dána konstantně probíhajícími mutačními změnami ve struktuře povrchových antigenů, důsledkem čehož je výskyt chřipkových epidemií a pandemií. Chřipka může mít charakter epidemie nebo pandemie, které se vzájemně liší četností výskytu (každoroční sezónní epidemie versus pandemie s odstupem desítky let) a geografickým rozšířením (lokální epidemie versus pandemie přesahující hranice světadílů).11 Z důvodu neustálého rizika vzniku pandemie navrhuje každoročně WHO strategii „WHO standards for influenza surveillance“.

Jediným možným způsobem kontroly chřipky je vakcinace (a případně technická opatření, jako jsou roušky). Účinnost vakcíny proti chřipce je časově omezená jedním rokem. Chřipkové viry podléhají neustálým mutacím, které během pouhého roku změní strukturu viru tak, že opakované použití stejné vakcíny i následující rok by nebylo účinné. Kvůli neustálému potenciálnímu riziku rychlého rozšíření nově vzniklého pandemického subtypu, se výzkumné skupiny po celém světě snaží vyvinout jednoduché, rychlé a levné metody, jimiž by se dal spolehlivě detekovat jakýkoliv virus chřipky. Standardně se k detekci chřipky používají techniky PCR (Polymerase Chain Reaction) a ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay), které jsou však poměrně časově a instrumentálně náročné.

Oproti ostatním metodám mají, systémy založené na elektrochemické detekci potenciál k miniaturizaci a propojení s technologií „lab on chip“ s potenciálem pro vývoj přenosných detekčních zařízení. V případě vzniku nového pandemického kmenu chřipky by mohly být výhody této metody klíčové, protože by umožnila rychlé a specifické stanovení chřipkového viru kdekoliv a za jakýchkoliv podmínek. Taková technická zařízení usnadní práci v terénu i ordinacích jak pro rychlou diagnostiku u pacienta, ale také pro ochranu ošetřujícího personálu.

Práce je spojená s projektem CEITEC CZ.1.05/1.1.00/02.0068.


Zemědělská 1/1665
613 00 Brno
Budova D
Tel.: +420 545 133 350
Fax.: +420 545 212 044